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大鼠腦缺血再灌注損傷模型模型：麻醉大鼠，然后在頸部中線切開一個(gè)切口，暴露頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈，用無菌縫合線結(jié)扎，血管夾夾住頸內(nèi)動(dòng)脈。隨后在頸總動(dòng)脈上切口，然后插入線栓。2h后，大鼠進(jìn)行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)：大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱，對(duì)側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評(píng)分在1-3分，48小時(shí)內(nèi)沒有死亡，就認(rèn)為模型成功。文獻(xiàn)上用的是2-3分的模型。優(yōu)點(diǎn)：無需開顱，創(chuàng)傷較小；缺血部位相對(duì)固定，可控性好；可實(shí)現(xiàn)腦缺血后再灌注，是理想的標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?。?dòng)物選擇：目前多...

染色原理：所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理不陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(苯胺藍(lán))，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。Masson染色特點(diǎn)：1、染色穩(wěn)定2、分化時(shí)間短，1～2s3、色彩清晰鮮艷4、適用范圍廣，適宜于組織的石...

進(jìn)行分子實(shí)驗(yàn)檢測時(shí)需要先準(zhǔn)備PCR反應(yīng)混合物：根據(jù)DNA樣本的數(shù)量來確定除了DNA外其他混合物的體積（額外增加一份來確保有足夠的PCR反應(yīng)混合物），將擴(kuò)增每一個(gè)遺傳標(biāo)記并且在每一個(gè)PCR反應(yīng)管內(nèi)分19.5uL的反應(yīng)混合物。配制膠溶液：將25g尿素、7.5mL40%丙烯酰胺：PDA(19:1)加入到250mL的錐形瓶中。加蒸餾水至50mL，充分混勻來溶解尿素(見注釋4)。準(zhǔn)備制膠板：把膠板洗干凈，確保上面沒有灰塵，用硅化玻璃板。根據(jù)各個(gè)廠家的不同把玻璃板夾在一起并且用膠條封住底...

石蠟切片(paraffinsection)組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的方法。不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法，而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。教學(xué)中，光鏡下觀察切片標(biāo)本多數(shù)是石蠟切片法制備的?；畹募?xì)胞或組織多為無色透明，各種組織間和細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差，在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出;組織離開機(jī)體后很快就會(huì)死亡和產(chǎn)生組壞死，失去原有正常結(jié)構(gòu)，因此，組織要經(jīng)固定、石蠟包埋、切片...

一、背景大腦皮層是調(diào)節(jié)軀體運(yùn)動(dòng)的高級(jí)中樞。它由初級(jí)感覺區(qū)、初級(jí)運(yùn)動(dòng)區(qū)和聯(lián)合區(qū)三部分構(gòu)成。人類大腦皮層的神經(jīng)細(xì)胞約有140億個(gè)，面積約2200平方厘米，主要含有錐體形細(xì)胞、梭形細(xì)胞和星形細(xì)胞（顆粒細(xì)胞）及神經(jīng)纖維。體外原代培養(yǎng)神經(jīng)元作為神經(jīng)科學(xué)研究的有力手段，越來越受到廣大科研工作者的重視。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞，動(dòng)物出生后很少分裂，相對(duì)于其它細(xì)胞而言，神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此，體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.無菌條件下，從懷...

一、背景大腦皮層是調(diào)節(jié)軀體運(yùn)動(dòng)的高級(jí)中樞。它由初級(jí)感覺區(qū)、初級(jí)運(yùn)動(dòng)區(qū)和聯(lián)合區(qū)三部分構(gòu)成。人類大腦皮層的神經(jīng)細(xì)胞約有140億個(gè)，面積約2200平方厘米，主要含有錐體形細(xì)胞、梭形細(xì)胞和星形細(xì)胞（顆粒細(xì)胞）及神經(jīng)纖維。體外原代培養(yǎng)神經(jīng)元作為神經(jīng)科學(xué)研究的有力手段，越來越受到廣大科研工作者的重視。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞，動(dòng)物出生后很少分裂，相對(duì)于其它細(xì)胞而言，神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此，體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.無菌條件下，從懷...

一、背景海馬是大腦顳葉內(nèi)側(cè)的一個(gè)解剖結(jié)構(gòu)，因?yàn)樾螤铑愃坪ｑR稱為海馬體。海馬體的主要組成基本單位是神經(jīng)元，海馬神經(jīng)元的生理功能與人的記憶密切相關(guān)。一些疾病會(huì)使海馬神經(jīng)元出現(xiàn)損傷，比如常見的阿爾茲海默病、單純皰疹病毒性腦炎、自身免疫性腦炎等等，如果這些疾病出現(xiàn)，就會(huì)導(dǎo)致記憶障礙，甚至癡呆的表現(xiàn)。神經(jīng)細(xì)胞是近代神經(jīng)學(xué)科中研究重點(diǎn)之一，神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)是指在體外模擬建立體內(nèi)生長條件，使神經(jīng)細(xì)胞或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在其生存和生長并維持其形態(tài)和功能的方法。神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)已成為當(dāng)今神經(jīng)科學(xué)...