當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章
4-23
1.對于貼壁細(xì)胞或細(xì)胞涂片PBS洗滌一次。2.如果細(xì)胞貼得不牢,可以干燥樣品使細(xì)胞貼得更牢。3.用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15分鐘,用PBS洗滌一次。4.將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)源性過氧化物酶封閉液,室溫孵育10分鐘,PBS充分淋洗;5.滴加正常山羊血清封閉液,室溫30分鐘,甩去多余液體;6.滴加一抗工作液,37℃孵育2h(或4℃過夜),然后PBS充分淋洗;7.滴加兔/鼠二抗工作液,室溫孵育1h,PBS充分淋洗;8.DAB顯色5-10分鐘,在顯微鏡下掌握...
4-23
一般使用辣根過氧化物酶HRP-ECL發(fā)光法或堿性磷酸酶AP-NBT/BICP顯色法。1.HRP-ECL發(fā)光法:將A、B發(fā)光液按比例稀釋混合。膜用去離子水稍加漂洗,濾紙貼角吸干,反貼法覆于A、B混合液滴上,熄燈至可見淡綠色熒光條帶(5min左右)后濾紙貼角吸干,置于保鮮膜內(nèi)固定于片盒中,迅速蓋上膠片,關(guān)閉膠盒,根據(jù)所見熒光強(qiáng)度曝光。取出膠片立即*浸入顯影液中1~2min,清水漂洗一下后放在定影液中至底片*定影,清水沖凈晾干,標(biāo)定Marker,進(jìn)行分析與掃描。2.AP-NBT/B...
4-17
目的:研究楊梅苷對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法:60只SD大鼠隨機(jī)分為6組:正常對照組、模型組、陽性給藥組(維拉帕米100μg/L)和楊梅苷低中高劑量組(2.5,5,10mg/L),每組10只。釆用Langendorff離體心臟灌流技術(shù),停灌30min,再灌45min,造成心肌缺血再灌注損傷模型。記錄楊梅苷對心臟血流動力學(xué)指標(biāo)的影響,測定冠脈流出液中心肌三酶LDH、CK、AST的水平,心肌組織中抗氧化酶SOD、CAT的活性及脂質(zhì)過氧化物MDA的含量。HE...
4-17
目的:探討和比較不同干預(yù)方案下辛伐他汀對去卵巢大鼠骨丟失和骨質(zhì)量下降的干預(yù)效果。方法:3月齡雌性SD大鼠32只,隨機(jī)分為4組,每組8只:假手術(shù)(A)組、卵巢切除(B)組、卵巢切除加辛伐他汀前半程干預(yù)組(C)和后半程干預(yù)組(D)。除A組接受假手術(shù)外,其余各組大鼠行雙側(cè)卵巢切除術(shù),C組于術(shù)后給予辛伐他汀(5mg/kg/d)干預(yù)10周后停藥,D組于術(shù)后10周開始接受辛伐他汀干預(yù)。術(shù)后20周處死所有大鼠,采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測血清I型前膠原氨基端前肽(PINP)、I...
4-17
目的:擬研究心室肌細(xì)胞外基質(zhì)能否促進(jìn)植入心肌梗死心肌組織內(nèi)的心肌球源性心肌干細(xì)胞(CDC)向心肌細(xì)胞,血管內(nèi)皮及血管平滑肌細(xì)胞分化,改善大鼠心肌梗死后的心臟結(jié)構(gòu)及功能。方法:心肌組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)CDC,脫細(xì)胞法配置ECM,結(jié)扎Wistar大鼠前降支建立急性心肌梗死模型。分別向心肌梗死心肌組織內(nèi)注入IMDM(I組),ECM懸液(E組),含106CDCs的IMDM溶液(IC組),含106CDCs的ECM懸液(EC組),每組心肌梗死大鼠6只。3周后心臟彩超評估心臟功能,Masson...
4-15
目的:觀察公路運(yùn)輸對新西蘭兔血液常規(guī)和生化指標(biāo)的影響。方法:選用12只健康普通級新西蘭兔進(jìn)行2h公路運(yùn)輸,分別在運(yùn)輸前,運(yùn)輸后0、24、48、72、96h采集血液獲得檢測樣本。通過血液分析儀檢測血常規(guī)指標(biāo):白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白量(HGB)、紅細(xì)胞壓積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板(PLT)。通過全自動生化分析儀檢測:肝功能指標(biāo):丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、白蛋白(...
4-15
目的本研究旨在采集不同發(fā)育階段幼齡SD大鼠的血液指標(biāo),建立相應(yīng)的背景數(shù)據(jù),為開展兒科藥物安全性評價提供參考。方法分別收集3、6、8、12和16周齡共計約200余只幼齡SD大鼠的血樣,采用全自動血球計數(shù)儀、生化分析儀、測定相應(yīng)指標(biāo)。結(jié)果從各指標(biāo)參數(shù)結(jié)果看,6周齡組大鼠的血液指標(biāo)與16周齡大鼠相比RBC、HGB、TP、BUN等大部分指標(biāo)存在一定差別,12周齡組大鼠的血液指標(biāo)與16周齡大鼠相比WBC、HGB、BUN等大部分指標(biāo)無差異。結(jié)論結(jié)果表明不同周齡階段的幼齡SD大鼠的血液指標(biāo)...
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息